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磁性复合材料 |
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磁珠法DNA提取试剂盒
( 型号 : huier-008 )
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1、 裂解:用手电钻取干净的骨松质0.2克左右,加入0.3ml的1M DDT,在研钵内研磨成细泥状,取0.1克(约绿豆大小)放入1.5ml离心管(EP管)中,加入PK20µL,裂解液300µL,振荡均匀,65°C温育1h,取出后在移液器吸头上包裹双层细丝网,吸取上清液200µL转移到另一新的EP管中。也可高速离心10分钟,吸取上清液200µL转移到另一新的EP管中。对肌肉、内脏等组织先用剪刀剪成碎粒状,再仿照上述方法操作。
2、 结合:在EP管中加入摇匀的磁珠混悬液200µL,用移液器500µL档抽吸8下混匀,室温25°C放置6分钟,其中间隔3分钟时轻摇数下EP管混匀。
3、 洗涤:将EP管插入到磁架上,使磁珠都吸到管壁上,然后再磁架上小心吸弃液(不要吸掉磁珠)。从磁架上取下EP管,加入600µL洗涤液,用移液器700µL档抽吸8下混匀,静置30秒,再放到磁架上进行磁分离,使磁珠都吸到管壁上。然后吸弃液体(一定要吸干净)。重复步骤3在洗涤一次。室温下开盖干燥磁珠3分钟。
4、 洗脱:取下EP管,加入100µL洗脱液,用移液器150µL档抽吸8下混匀,置于恒温水箱中65°C温育10分钟,其中间隔3分钟时轻摇数下混匀。10分钟后,取出EP管,立即进行磁分离,小心转移上清液至另一新的EP管中,供下游实验用。
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